Фариба Наери, Амир Рамезани, Ларс Энг и Аннет Теодорссон
Предыстория: У пациентов с клиническими симптомами респираторной инфекции быстрое выявление случаев, требующих антибактериальной терапии, имеет решающее значение для предотвращения развития множественных резистентных бактерий. Нейтрофилы являются важными членами врожденного иммунитета, а нейтрофильные внеклеточные ловушки (НЭЛ) высвобождаются нейтрофилами для контроля микробной инфекции. Здесь мы разработали доступный, стабильный, осуществимый и точный диагностический инструмент, обнаруживающий отрицательно заряженные вещества (например, олигонуклеотиды) в мокроте пациентов с пневмонией, которые показали высокую и мгновенную реакцию на анилиновые красители. Мы оценили способность этого нового теста обнаруживать бактериальную инфекцию в случаях пневмонии. Методы: Был разработан колориметрический тест. Оставшиеся образцы мокроты (n=467) от пациентов с подозрением на пневмонию были слепо протестированы с использованием индексного теста. Эти результаты были сравнены с конечными результатами, которые были определены с помощью независимых клинических и лабораторных оценок, проведенных врачом пациента. Образцы мокроты были дополнительно проанализированы с помощью ИФА, поверхностного плазмонного резонанса, SDS-PAGE и ультрафиолетово-видимой спектрофотометрии.
Результаты: Тест распознал пневмонию с высокой точностью (внебольничная и нозокомиальная пневмония, n=73 и контрольные n=192 без инфекции, чувствительность 97,2%, специфичность 78,2%, отрицательная прогностическая ценность 96,4% и положительная прогностическая ценность 82,6). Результаты были в высокой степени коррелированы с наличием фактора роста гепатоцитов в образцах (R=81%). Положительный результат теста присутствовал даже после ультрафильтрации образцов в фильтрах <50 кДа. УФ-видимый спектр в образцах с положительным результатом теста показал пик приблизительно при 265 нм, который значительно отличался от контрольных. Выводы: Наличие белков и нуклеиновых кислот в месте бактериальной инфекции может указывать на высвобождение NET из нейтрофилов. Новый скрининговый тест имеет потенциал для диагностики пневмонии на ранней стадии и, таким образом, снижения смертности и заболеваемости, для назначения антибиотиков, для мониторинга терапии и снижения затрат, что особенно важно в плохо оборудованных центрах и сельской местности.
Примечание: эта работа была представлена на 8- й Международной конференции по инфекционным заболеваниям, 7–8 июня 2018 г., Лондон, Великобритания.