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उन्नत क्रोमैटोग्राफी 2020: झींगा एंजाइमेटिक हाइड्रोलिसिस से एंटीऑक्सीडेंट पेप्टाइड्स का शुद्धिकरण और लक्षण वर्णन - ज़ुएकिन लियू-जियांग्सू महासागर विश्वविद्यालय

ज़ुएक़िन लियू

परिचय:

यांत्रिक तैयारी से प्राप्त पेनेअस केराथुरस के झींगा सिर को व्यावसायिक ट्रिप्सिन (0.1%) द्वारा हाइड्रोलाइज़ किया गया। हाइड्रोलिसिस प्रतिक्रिया को यौगिक (95 डिग्री सेल्सियस) के ताप निष्क्रियण द्वारा समाप्त किया गया, जिसके बाद सेंट्रीफ्यूजेशन किया गया। उत्पादित प्रोटीन हाइड्रोलिसेट्स को प्रोटीन सामग्री, पूर्ण मुक्त अमीनो एसिड (एफएए), कुल मिलाकर अस्थिर आवश्यक नाइट्रोजन (टीवीबी-एन) और इलेक्ट्रोफोरेसिस एसडीएस-पीएजीई प्रोफ़ाइल के लिए जैव रासायनिक जांच द्वारा चित्रित किया गया था। उपयोगी गुणों, जैसे कि पायसीकारी क्षमता, वसा अवशोषण और झाग गुण का मूल्यांकन किया गया। कच्चे झींगा सिर प्रोटीन की तुलना में, एंजाइमेटिक हाइड्रोलिसिस के परिणामों ने प्रोटीन सामग्री और एफएए (17.22%) में उल्लेखनीय वृद्धि (पी < 0.05) दिखाई। इस अध्ययन में प्रयुक्त ट्रिप्सिन की कम मात्रा सब्सट्रेट को घुलनशील बनाने के लिए पर्याप्त थी, जिसके परिणामस्वरूप काफी मात्रा में प्रोटीन तत्व और TVB-N स्तर (< 6mg/100g) प्राप्त हुआ, जो समुद्री उत्पादों के लिए निर्मित सीमा से काफी कम था।

झींगा अपशिष्ट एस्टैक्सैंथिन का एक महत्वपूर्ण स्रोत है, जो प्रोटीन के साथ एक जटिल के रूप में होता है, और प्रोटीन के साथ-साथ कैरोटीनॉयड में भी एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि होती है। बैक्टीरिया प्रोटीज का उपयोग करके झींगा अपशिष्ट के हाइड्रोलिसिस को बेहतर बनाने के लिए परीक्षण किए गए ताकि एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि से भरपूर प्रोटीन सीमा प्राप्त की जा सके। तीन प्रक्रिया कारकों के प्रभाव को विशेष रूप से अपशिष्ट में उत्प्रेरक निर्धारण, कैरोटीनॉयड रिकवरी पर हैचिंग तापमान और समय, प्रोटीन सामग्री, ट्राइक्लोरो एसिडिक एसिड (TCA) घुलनशील पेप्टाइड पदार्थ और डिफेनिल पिक्रिल हाइड्रैजिलक्लोराइड (DPPH) खोज गतिविधि का आंशिक रूप से कारक योजना का उपयोग करके मूल्यांकन किया गया था। शेलफिश जैसे कि झींगा को संभालने से बड़ी मात्रा में ठोस अपशिष्ट उत्पन्न होते हैं जो पूरे झींगा वजन का लगभग 35-45% होता है। ये मुकुट को जल्दी से बर्बाद कर देते हैं, जिससे जैविक समस्याएं होती हैं। इसके अलावा, चूंकि झींगा अपशिष्ट प्रोटीन, काइटिन, कैरोटीनॉयड और एंटीऑक्सिडेंट का एक समृद्ध स्रोत है, इसलिए हाल ही में इन महत्वपूर्ण घटकों को खाद्य उत्पादों के रूप में पुनः प्राप्त करने के लिए महत्वपूर्ण गुणवत्ता का प्रदर्शन किया गया है।

Astaxanthin is the significant carotenoid present in scavanger squander, and happens as carotenoprotein buildings, where carotenoids are bound to proteins. Complexing of carotenoids to protein brings about presentation of different hues in shellfish and gives soundness to carotenoids, which are in any case entirely insecure. Endeavors have been made to recuperate carotenoids from shrimp squander either as carotenoids or as carotenprotein complex. Studies have been done on recuperation of carotenoids and carotenoproteins from shellfish squander. Carotenoids from shrimp squander have been recuperated utilizing dissolvable extraction and oil extraction and its security under various stockpiling conditions has been accounted for. Enzymatic hydrolysis of shrimp squander was found to improve the oil extractability of carotenoids. Carotenoproteins from shrimp waste can be confined by enzymatic and maturation methods. Chelating operators like EDTA and the proteolytic compound trypsin has been utilized to recuperate carotenoprotein from shrimp squander. Trypsin hydrolysis of snow crab squander followed by ammonium sulfate precipitation yielded carotenoprotein with expanded carotenoid content. Sea life organic cancer prevention agent peptides have become a hotpots in multidisciplinary research, for example, current biomedicine. Hydrolysis of shrimp squander with proteases was found to upgrade the carotenoid recuperation. Carotenoids happen as a complex with protein in scavangers and proteases upset the protein-carotenoid bond, along these lines expanding the carotenoid recuperation. Protease treatment for long time upgraded carotenoid recuperation when the objective is to recoup carotenoid either by oil or dissolvable extraction. Be that as it may, if the objective is to separate carotenoprotein, extraordinary hydrolysis may totally disturb this security bringing about lower carotenoid content in the protein detach. Accordingly controlled hydrolysis of shrimp squander with proteases with lower catalyst level at lower temperature will help in acquiring the protein disconnect wealthy in carotenoid content. Shrimp squander is a significant wellspring of astaxanthin, which happen as a complex with proteins, and protein confines just as carotenoids are known to have cell reinforcement movement. Examinations were done to streamline hydrolysis of shrimp squander utilizing a bacterial protease to get cell reinforcement movement rich protein segregate. The impact of three procedure factors in particular chemical fixation to squander, brooding temperature and time on carotenoid recuperation, protein content, trichloro acidic corrosive (TCA) solvent peptide substance and DiPhenyl Picryl Hydrazylchloride (DPPH) rummaging movement was assessed utilizing a partially factorial structure. A high connection coefficient (>0.90) between the watched and the anticipated qualities showed the fittingness of the plan utilized. Most extreme carotenoid recuperation was gotten by hydrolysing the shrimp squander with 0.3 % chemical for 4 h. DPPH radical rummaging action of carotenoprotein confine was especially influenced by protein focus, temperature and time of hydrolysis. The examination showed that so as to acquire the carotenoprotein from shrimp squander with higher carotenoid content hydrolysing with a catalyst grouping of 0.2–0.4 %, at lower temperature of 25–30° upto 4 h is perfect. Be that as it may, so as to get the protein disengage with expanded cancer prevention agent movement hydrolysing at higher temperature of 50 °C, with higher catalyst convergence of 0.5 % for shorter length is increasingly perfect.

तरीका:

पेनेअस इंडिकस से झींगा के सिर और कवच को नजदीकी बाजार से एकत्र किया गया और ठंडी अवस्था में अनुसंधान केंद्र में ले जाया गया। उपयोग से पहले सामग्री को टेबल टॉप वर्टिकल शेपर (रोबो-कूप) में होमोजेनाइज़ किया गया। हाइड्रोलिसिस के लिए मेसर्स जेनेनकोर से एक बैक्टीरियल प्रोटीज़, अल्केलेस का उपयोग किया गया। इस जांच में, झींगा गोंद के लाइओफिलाइज्ड पाउडर को कच्चे माल के रूप में उपयोग किया गया था, और झींगा गोंद कच्चे माल से अलग किए गए प्रोटीज़-निर्माण स्ट्रेन द्वारा उत्पादित प्रोटीज़ को हाइड्रोलाइज़ किया गया था।

परिणाम:

10 ग्राम झींगा पाउडर को 50 एमएल परिष्कृत पानी में तोड़ा गया और मिश्रण का पीएच 1 एम एचसीएल का उपयोग करके 6.0 पर इस्तेमाल किया गया। उस समय, उत्प्रेरक और सब्सट्रेट के अनुपात में एसटी-1प्रोटीज को शामिल किया गया था। मिश्रण को हिलाते हुए 50 â„ÂÆ' पर रखा गया था। 6 घंटे की हैचिंग के बाद, मिश्रण को 100 â„ÂÆ' पर 15 मिनट के लिए गर्म किया गया ताकि एसटी-1प्रोटीज को निष्क्रिय किया जा सके। शराब का अवक्षेपण: मिश्रण को 40 â„ÂÆ' तक ठंडा किया गया और पानी को निकालने के लिए रोटा-वैनिश किया गया। फिर निर्जल इथेनॉल मिलाया गया और 12 घंटे तक घोल तैयार किया गया। घोल को 15 मिनट के लिए 8000 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज किया गया और झींगा गोंद पेप्टाइड्स (एसपी) प्राप्त करने के लिए सतह पर तैरनेवाला को वैक्यूम के तहत सुखाया गया, जिसे फिर जेल सेक्शन जी-25 द्वारा अलग और शुद्ध किया गया।

निष्कर्ष:

सेल सुदृढीकरण क्रिया परीक्षण के परिणामों ने संकेत दिया कि भाग तीन ने उच्च कैंसर की रोकथाम एजेंट क्रिया प्रदर्शित की; खंड तीन को चार खंडों को प्राप्त करने के लिए उच्च स्तर के द्रव चरण (RP-HPLC) को मोड़कर एकत्र और अलग किया गया। सीमित कैंसर की रोकथाम एजेंट पेप्टाइड उच्च DPPH रम्मिंग क्रिया, आम तौर पर महान हाइड्रॉक्साइड रेडिकल और सुपरऑक्साइड आयन खोज गतिविधि दिखाता है। सेल सुदृढीकरण पेप्टाइड्स में नैदानिक, सुधारात्मक, पुनर्स्थापनात्मक और खाद्य अनुप्रयोगों में सुधार की व्यापक संभावनाएं हैं।